Detección de Allorhizobium vitis desde lloro primaveral en cuatro cultivares de Vitis vinifera en la Región del Libertador Bernardo O’Higgins

Abstract

Agrobacterium es un género de bacterias Gram negativas que incluye especies patógenas como lo son A. rhizogenes, A. rubi, A. tumefaciens que pueden afectar a un gran número de especies frutales, y Agrobacterium vitis, actualmente denominada como Allorhizobium vitis, la cual es exclusiva de vides. All. vitis puede o no presentar un plásmido inductor de tumores, y permanecer latente en el xilema, una vez se produzca una herida en la planta, esta bacteria activa sus mecanismos de virulencia para provocar agallas de la corona; esta enfermedad puede provocar pérdidas económicas asociadas con la reducción del rendimiento y longevidad de las plantas. En Chile actualmente está ocurriendo un recambio varietal, por lo que la detección temprana de Allorhizobium vitis en plantas asintomáticas es fundamental para poder implementar medidas de control preventivas. Mediante la combinación de pruebas microbiológicas y moleculares es posible la detección temprana de la bacteria usando como base la recolección y procesamiento de lloro primaveral de plantas asintomáticas. La colecta de lloro primaveral en vides asintomáticas fue realizada en los cultivares Cabernet Sauvignon, Viognier, Carmenere y Pinot Noir provenientes de dos huertos comerciales de la región de O´Higgins. La obtención de aislados de All. vitis se realizó sembrando 50 μL de lloro primaveral en medios de cultivo semi-selectivo RS y nutritivos con antifúngico, respectivamente. La detección por pruebas moleculares se realizó utilizando partidores específicos para el gen pehA (PGF/PGR) y virC (VCF3/VCR3). Mediante la combinación de estas técnicas se detectó All. vitis en 8.3% de las plantas analizadas (3 Cabernet Sauvignon y 1 Viognier), estos aislados no presentaron el plásmido Ti. Sólo se obtuvieron resultados positivos a Allorhizobium vitis mediante pruebas moleculares realizadas en ADN extraído de colonias bacterianas, por otro lado, no se logró detectar Allorhizobium vitis en pruebas moleculares realizadas directamente al lloro primaveral. Esta investigación contribuye a la detección de cepas chilenas de All. vitis en el valle de Colchagua, como así también al estudio de la bacteria a nivel nacional para mejorar la gestión de la sanidad de las vides.